logo

Yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasida moddalarni aniqlash

Yuklangan vaqt:

23.11.2024

Ko'chirishlar soni:

0

Hajmi:

707 KB
Mavzu: Yuqori samarali suyuqlik Mavzu: Yuqori samarali suyuqlik 
xromatografiyasida moddalar ni xromatografiyasida moddalar ni 
aniqlash.aniqlash.   Xromatografiya  (xromo...  va  ...grafiya)  —  gaz,  suyuklik  yoki  erigan 
moddalar  aralashmasini  adsorbsion  usulda  ajratish  va  analiz  qilish.  X.  rus 
botanigi  M.S.Svet  tomonidan  1903-yilda  kashf  etilgan.  1931-yilda  Kun  va  uning 
shogirdlari  X.  yordamida  tuxum  sarig idagi  ksantofil,  lutein  va  zeaksantin ʻ
moddalari  hamda  a  va  rkarotinlarni  ajratishdi.  1941-yilda  A.Martin  va  R.Sing 
taqsimlash  X.siga  asos  soldi  va  oqsil,  uglerod  birikmalarini  o rganishda  uning 	
ʻ
keng  imkoniyatlarini  ko rsatib  berdi.  1940—45  yillarda  S.Mur  va  U.Staynlar 	
ʻ
aminokislotalarni  X.  usulida  ajratish  va  miqdoriy  analiz  qilishga  katta  xissa 
qo shdi. 1950-yilda Martin va Jeyms gazsuyuklik X.si usulini ishlab chiqdi. X. olib 	
ʻ
borilayotgan  muxitga  qarab  gaz,  gazsuyuqlik  va  suyuklik  X.lariga,  moddalarni 
ajratish  mexanizmiga  qarab  molekulyar  (adsorbsion),  ion  almashtirgich, 
cho ktirish  va  taqsimlash  X.lariga,  olib  borilayotgan  jarayon  shakliga  qarab 
ʻ
kolonkali,  naychali  (kapillyar),  qog ozli  va  yupqa  qatlamli  X.larga  bo linadi. 	
ʻ ʻ
Adsorbsion X. — moddalarning adsorbentda turlicha sorbsiyalanishi (yutilishi)ga 
asoslangan;  taqsimlash  X.si  —  aralashma  tarkibiy  qismi  (komponentlari)ning 
qo zg almas  faza  (g ovak  sathli  qattiq  modda  yuzasiga  o rnatilgan  yuqori  trada 	
ʻ ʻ ʻ ʻ
qaynaydigan  suyuq  modda)  va  elyuyentlarda  turlicha  erishiga;  ion  almashtirgich 
X. — harakatsiz faza (ionit) va ajraluvchi aralashma komponentlari orasidagi ion 
almashtirish  muvozanati  konstantalar  farqiga;  cho ktirish  X.si  esa  ajratiluvchi 	
ʻ
komponentlarning qattiq qo zg almas faza ustida turlicha cho kmaga cho kishiga 	
ʻ ʻ ʻ ʻ
asoslangan.                    Xromatograf  deb  ataladigan  asbob  yordamida  amalga 
oshiriladi.  Analiz  vaqtida  xromatograf  kolonkasiga  yuborilgan 
tekshiriluvchi  moddalar  elyuyent  bilan  birga  turli  vaqg  oralig ida ʻ
alohidaalohida  bo lib  kolonkaning  chiqish  tomoniga  keladi  va  maxsus 	
ʻ
sezgir asbob — detektor yordamida uning vaqt birligidagi miqdori qayd 
etiladi,  ya ni  egri  chiziq  holida  yozib  olinadi.  Bu  xromatogramma  deb 	
ʼ
ataladi.  Sifat  analizi  vaqtida  moddaning  kolonkaga  yuborilgandan  to 
chiqqungacha  bo lgan  vaqgi  har  bir  komponent  uchun  doimiy  trada  bir 	
ʻ
xil  elyuyentda  belgilab  olinadi.  Miqdoriy  analiz  uchun  esa  X.dagi  piklar 
(har  bir  modda  uchun  tegishli  egri  chiziq  shakli)  balandligi  yoki  yuzasi, 
detektorning  moddaga  nisbatan  sezgirligini  nazarga  olgan  holda 
o lchanadi va maxsus usulda hisoblanadi.	
ʻ
Parchalanmay  bug   holatiga  o tadigan  moddalarning  analizi  va 	
ʻ ʻ
ajratilishi  uchun  ko pincha  gaz  X.  ishlatiladi.  Bunda  elyuyent  (gaz 	
ʻ
tashuvchi)  sifatida  geliy,  azot,  argon  kabi  gazlardan  foydalaniladi. 
Sorbent sifatida esa (zarralar diametri 0,1—0,5 mm bo lgan) silikagellar, 	
ʻ
alyumogellar, g ovakli polimerlar va boshqa ishlatiladi.	
ʻ   Suyuq xromatografiya turli sohalarda tadqiqot, ishlab chiqish va sinov uchun mashhur usuldir. 
Ammo barcha usullar bir xil emas. Aslida, standart usulda turli xil o'zgarishlarni o'z ichiga 
olgan bir qator suyuq xromatografiya turlari mavjud.
Suyuqlik xromatografiyasining 8 turini va ular qanday ishlashini ko'rib chiqamiz.
Oddiy fazali suyuqlik xromatografiyasi
Bu qattiq qutbli statsionar fazali qutbsiz namunalarni sinash uchun ishlatiladigan suyuq 
xromatografiya uchun standart protsedura. Qutbsiz suyuq erituvchi eng past qutbga ega bo'lgan 
birikmalarni birinchi bo'lib, eng yuqori qutbga ega bo'lganlarni esa oxirgi ajratish imkonini 
beradi.
Teskari fazali suyuqlik xromatografiyasi
Yu qoridagi usuldan farqli o'laroq, teskari fazali suyuqlik xromatografiyasi qutbli suyuqlik 
erituvchi bilan qutbsiz statsionar fazadan foydalanadi. Ushbu birikma tufayli yuqori qutbli 
birikmalar birinchi bo'lib, undan keyin pastki qutbli birikmalar ajratiladi.
Yu qori samarali suyuqlik xromatografiyasi
Yu qori samarali suyuqlik xromatografiyasi bosimli suyuqlikni ustunlar orqali o'tkazish uchun 
nasoslardan foydalanadi. Natija tezroq, sezgirroq tahlil bo'lib, bu oddiy faza va teskari faza 
uchun yuqorida tavsiflangan ikkala polarit kombinatsiyasi yordamida amalga oshirilishi 
mumkin.
Fleshli xromatografiya
Yu qorida tavsiflangan usullar birikmalarni ajratish uchun tortishish kuchiga tayangan bo'lsa-
da, flesh-xromatografiya harakatchan fazani statsionar fazadan o'tkazish uchun inert gazdan 
foydalanadi. Bu yuqoridagi usullardan ancha tezroq, lekin ayni paytda qimmatroq.      
Bo'linish xromatografiyasiBo'linish xromatografiyasi

Suyuq  xromatografiya  odatda  suyuq  mobil  fazani  va  qattiq Suyuq  xromatografiya  odatda  suyuq  mobil  fazani  va  qattiq 
statsionar  fazani  o'z  ichiga  oladi  -  adsorbsion  xromatografiya  deb statsionar  fazani  o'z  ichiga  oladi  -  adsorbsion  xromatografiya  deb 
nomlanadi.  Boshqa  tomondan,  bo'linish  xromatografiyasi  ikkalasi nomlanadi.  Boshqa  tomondan,  bo'linish  xromatografiyasi  ikkalasi 
uchun  ham  suyuqlikdan  foydalanadi.  Ular  turli  bo'linish uchun  ham  suyuqlikdan  foydalanadi.  Ular  turli  bo'linish 
koeffitsientlari asosida ajratiladi.koeffitsientlari asosida ajratiladi.

O'lchamni istisno qilish xromatografiyasiO'lchamni istisno qilish xromatografiyasi

Molekulyar  elak  deb  ham  ataladigan  bu  turdagi  suyuqlik Molekulyar  elak  deb  ham  ataladigan  bu  turdagi  suyuqlik 
xromatografiyasi  birikmalarni  molekulalarining  o'lchamiga  qarab xromatografiyasi  birikmalarni  molekulalarining  o'lchamiga  qarab 
ajratadi. Suyuq harakatlanuvchi faza qattiq statsionar fazadan o'tadi, ajratadi. Suyuq harakatlanuvchi faza qattiq statsionar fazadan o'tadi, 
kichikroq  birikmalar  esa  statsionar  faza  ichidagi  g'ovaklarni  yo'lda kichikroq  birikmalar  esa  statsionar  faza  ichidagi  g'ovaklarni  yo'lda 
to'xtatadi.to'xtatadi.      
Ya qinlik xromatografiyasiYa qinlik xromatografiyasi

Yaqinlik  xromatografiyasi  molekulyar  bog'lanishlar Yaqinlik  xromatografiyasi  molekulyar  bog'lanishlar 
bilan bog'liq. Mobil faza metall bog'lanish xususiyatlari bilan bog'liq. Mobil faza metall bog'lanish xususiyatlari 
uchun  maxsus  tanlanadi.  Namuna  statsionar  fazadan uchun  maxsus  tanlanadi.  Namuna  statsionar  fazadan 
o'tganda, bog'lanmagan molekulalar (analitlar) o'tadi va o'tganda, bog'lanmagan molekulalar (analitlar) o'tadi va 
bog'lovchi molekulalar (ligandlar) ushlanadi.bog'lovchi molekulalar (ligandlar) ushlanadi.

Ion xromatografiyasiIon xromatografiyasi

Nihoyat,  ion  xromatografiyasi  yuqori  samarali Nihoyat,  ion  xromatografiyasi  yuqori  samarali 
suyuqlik  xromatografiyasining  bir  turi  bo'lib,  unda  ion suyuqlik  xromatografiyasining  bir  turi  bo'lib,  unda  ion 
birikmalari  qattiq  statsionar  faza  bilan  ijobiy  yoki birikmalari  qattiq  statsionar  faza  bilan  ijobiy  yoki 
manfiy ion almashinuviga qarab ajratiladi.manfiy ion almashinuviga qarab ajratiladi.   Yuqori  samarali  suyuqlik  xromatografiyasi (HPLC;ilgari	 yuqori  bosimli  suyuqlik Yuqori  samarali  suyuqlik  xromatografiyasi	 (HPLC;ilgari	 yuqori  bosimli  suyuqlik 
xromatografiyasi)  -aralashmadagi  komponentlarni  ajratish,  aniqlash  va  dozalash xromatografiyasi)  -aralashmadagi  komponentlarni  ajratish,  aniqlash  va  dozalash 
uchun	
 uchun  analitik  kimyoda
 	qo'llaniladigan usuldir. Uning asosiy konstruktiv xususiyati  qo'llaniladigan usuldir. Uning asosiy konstruktiv xususiyati 
qattiq	
 qattiq  adsorbent
 	materialdan  tayyorlangan  statsionar  faza  bo'ylab  mobil  fazani  materialdan  tayyorlangan  statsionar  faza  bo'ylab  mobil  fazani 
yuqori bosim  bilan siqib chiqaradigan  nasoslardir.Namunadagi  har  bir  komponent yuqori bosim  bilan siqib chiqaradigan  nasoslardir.Namunadagi  har  bir  komponent 
adsorbent  moddasi  bilan  turlicha  reaksiyaga  kirishadi,  shuning  uchun  ular  ustun adsorbent  moddasi  bilan  turlicha  reaksiyaga  kirishadi,  shuning  uchun  ular  ustun 
bo ylab  turli  tezlikda  harakatlanib,aralashmaning  ajralishiga  olib  keladi.	
ʻbo ylab  turli  tezlikda  harakatlanib,aralashmaning  ajralishiga  olib  keladi.ʻ
Zamonaviy  HPLC  qurilmasiHPLC  tuzilishi.  (1)  Erituvchi  moddalar  bo'lgan Zamonaviy  HPLC  qurilmasiHPLC  tuzilishi.  (1)  Erituvchi  moddalar  bo'lgan 
idishlar,  (2)  Solventni  gazsizlantirish,  (3)  Gradient  klapan,  (4) Mobil  fazani  etkazib idishlar,  (2)  Solventni  gazsizlantirish,  (3)  Gradient  klapan,  (4) Mobil  fazani  etkazib 
berish uchun aralashtirish idishi, (5) Yuqori bosimli nasos, (6) Injektor klapan "in" berish uchun aralashtirish idishi, (5) Yuqori bosimli nasos, (6) Injektor klapan "in" 
holatida, (6 ')) "Yuklash" holatida injektor klapan, (7) Namuna kiritish halqasi, (8) holatida, (6 ')) "Yuklash" holatida injektor klapan, (7) Namuna kiritish halqasi, (8) 
Old ustun (himoya ustuni), (9) Analitik ustun, (10) Detektor (masalan, IR, UV), (11) Old ustun (himoya ustuni), (9) Analitik ustun, (10) Detektor (masalan, IR, UV), (11) 
Ma'lumot  yig'uvchi,  (12)  Qoldiq  yoki  fraksiya  kollektori.Ma'lumot  yig'uvchi,  (12)  Qoldiq  yoki  fraksiya  kollektori.
HPLC  ko'p  maqsadlarda  qo'llaniladi:sanoatda  (masalan,dori  va  oziq-ovqat HPLC  ko'p  maqsadlarda  qo'llaniladi:sanoatda  (masalan,dori  va  oziq-ovqat 
mahsulotlarini  o'rganish  uchun),  qonunchilikda  (masalan,dopingni  aniqlash mahsulotlarini  o'rganish  uchun),  qonunchilikda  (masalan,dopingni  aniqlash 
uchun),  tadqiqotda  (masalan,murakkab  biologik  materialning  tarkibiy  qismlarini uchun),  tadqiqotda  (masalan,murakkab  biologik  materialning  tarkibiy  qismlarini 
ajratish  uchun)  va  tibbiyot  uchun  (masalan,  qon  testlari).ajratish  uchun)  va  tibbiyot  uchun  (masalan,  qon  testlari).

Mavzu: Yuqori samarali suyuqlik Mavzu: Yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasida moddalar ni xromatografiyasida moddalar ni aniqlash.aniqlash.

Xromatografiya (xromo... va ...grafiya) — gaz, suyuklik yoki erigan moddalar aralashmasini adsorbsion usulda ajratish va analiz qilish. X. rus botanigi M.S.Svet tomonidan 1903-yilda kashf etilgan. 1931-yilda Kun va uning shogirdlari X. yordamida tuxum sarig idagi ksantofil, lutein va zeaksantin ʻ moddalari hamda a va rkarotinlarni ajratishdi. 1941-yilda A.Martin va R.Sing taqsimlash X.siga asos soldi va oqsil, uglerod birikmalarini o rganishda uning ʻ keng imkoniyatlarini ko rsatib berdi. 1940—45 yillarda S.Mur va U.Staynlar ʻ aminokislotalarni X. usulida ajratish va miqdoriy analiz qilishga katta xissa qo shdi. 1950-yilda Martin va Jeyms gazsuyuklik X.si usulini ishlab chiqdi. X. olib ʻ borilayotgan muxitga qarab gaz, gazsuyuqlik va suyuklik X.lariga, moddalarni ajratish mexanizmiga qarab molekulyar (adsorbsion), ion almashtirgich, cho ktirish va taqsimlash X.lariga, olib borilayotgan jarayon shakliga qarab ʻ kolonkali, naychali (kapillyar), qog ozli va yupqa qatlamli X.larga bo linadi. ʻ ʻ Adsorbsion X. — moddalarning adsorbentda turlicha sorbsiyalanishi (yutilishi)ga asoslangan; taqsimlash X.si — aralashma tarkibiy qismi (komponentlari)ning qo zg almas faza (g ovak sathli qattiq modda yuzasiga o rnatilgan yuqori trada ʻ ʻ ʻ ʻ qaynaydigan suyuq modda) va elyuyentlarda turlicha erishiga; ion almashtirgich X. — harakatsiz faza (ionit) va ajraluvchi aralashma komponentlari orasidagi ion almashtirish muvozanati konstantalar farqiga; cho ktirish X.si esa ajratiluvchi ʻ komponentlarning qattiq qo zg almas faza ustida turlicha cho kmaga cho kishiga ʻ ʻ ʻ ʻ asoslangan.

Xromatograf deb ataladigan asbob yordamida amalga oshiriladi. Analiz vaqtida xromatograf kolonkasiga yuborilgan tekshiriluvchi moddalar elyuyent bilan birga turli vaqg oralig ida ʻ alohidaalohida bo lib kolonkaning chiqish tomoniga keladi va maxsus ʻ sezgir asbob — detektor yordamida uning vaqt birligidagi miqdori qayd etiladi, ya ni egri chiziq holida yozib olinadi. Bu xromatogramma deb ʼ ataladi. Sifat analizi vaqtida moddaning kolonkaga yuborilgandan to chiqqungacha bo lgan vaqgi har bir komponent uchun doimiy trada bir ʻ xil elyuyentda belgilab olinadi. Miqdoriy analiz uchun esa X.dagi piklar (har bir modda uchun tegishli egri chiziq shakli) balandligi yoki yuzasi, detektorning moddaga nisbatan sezgirligini nazarga olgan holda o lchanadi va maxsus usulda hisoblanadi. ʻ Parchalanmay bug holatiga o tadigan moddalarning analizi va ʻ ʻ ajratilishi uchun ko pincha gaz X. ishlatiladi. Bunda elyuyent (gaz ʻ tashuvchi) sifatida geliy, azot, argon kabi gazlardan foydalaniladi. Sorbent sifatida esa (zarralar diametri 0,1—0,5 mm bo lgan) silikagellar, ʻ alyumogellar, g ovakli polimerlar va boshqa ishlatiladi. ʻ

Suyuq xromatografiya turli sohalarda tadqiqot, ishlab chiqish va sinov uchun mashhur usuldir. Ammo barcha usullar bir xil emas. Aslida, standart usulda turli xil o'zgarishlarni o'z ichiga olgan bir qator suyuq xromatografiya turlari mavjud. Suyuqlik xromatografiyasining 8 turini va ular qanday ishlashini ko'rib chiqamiz. Oddiy fazali suyuqlik xromatografiyasi Bu qattiq qutbli statsionar fazali qutbsiz namunalarni sinash uchun ishlatiladigan suyuq xromatografiya uchun standart protsedura. Qutbsiz suyuq erituvchi eng past qutbga ega bo'lgan birikmalarni birinchi bo'lib, eng yuqori qutbga ega bo'lganlarni esa oxirgi ajratish imkonini beradi. Teskari fazali suyuqlik xromatografiyasi Yu qoridagi usuldan farqli o'laroq, teskari fazali suyuqlik xromatografiyasi qutbli suyuqlik erituvchi bilan qutbsiz statsionar fazadan foydalanadi. Ushbu birikma tufayli yuqori qutbli birikmalar birinchi bo'lib, undan keyin pastki qutbli birikmalar ajratiladi. Yu qori samarali suyuqlik xromatografiyasi Yu qori samarali suyuqlik xromatografiyasi bosimli suyuqlikni ustunlar orqali o'tkazish uchun nasoslardan foydalanadi. Natija tezroq, sezgirroq tahlil bo'lib, bu oddiy faza va teskari faza uchun yuqorida tavsiflangan ikkala polarit kombinatsiyasi yordamida amalga oshirilishi mumkin. Fleshli xromatografiya Yu qorida tavsiflangan usullar birikmalarni ajratish uchun tortishish kuchiga tayangan bo'lsa- da, flesh-xromatografiya harakatchan fazani statsionar fazadan o'tkazish uchun inert gazdan foydalanadi. Bu yuqoridagi usullardan ancha tezroq, lekin ayni paytda qimmatroq.